一、操作管理细则
1．进入细胞房开展实验的教师需了解和掌握细胞培养的相关实验方法和操作技巧，由教师填写准入单后，通知相关管理人员，经过培训方可进入实验室从事研究工作。未经负责人同意不得带未获准入资格的人员入内参观。
2．细胞培养室实行预约制度：预约人在预约群内预约实验时间、实验人员和超净台；超过预约时间30分钟未使用，其他人可以优先使用。
3．每天第一位进入细胞培养室的实验人员应开紫外灯照射半小时，照射完成后开风机换气，确保无菌环境。超净工作台必须用紫外灯照射半小时后方能进行实验。
4．进入细胞培养室前必须更换专用拖鞋和工作服，进行细胞查看及实验操作必须戴帽子、口罩与手套；进入细胞培养室后随手关门，不能带手套摸缓冲间门把手，三扇缓冲间拉门不能同时打开两扇，实验操作前需75%酒精消毒手掌、手背。整个操作严格执行无菌操作。
5．每一位实验人员的培养细胞应作好标记，禁止交叉乱用、乱放，未经许可不得随意处置他人的细胞，培养的细胞应及时使用和处理，如观察到细胞污染必须向细胞培养室负责人报告。细胞一旦发生污染、长霉，应立即采取措施，丢弃细胞，并用75%酒精将其摆放位置进行消毒。
6．实验完成后，必须用75%酒精棉球擦拭超净台，并将物品摆放整齐。检查酒精灯、酒精棉球、培养箱水盘水量等公用物品的使用情况，及时添加酒精，将移液器复位。细胞培养室冰箱、水浴锅、离心机、显微镜、卤素灯与超净工作台使用完毕后应及时关闭。
7．细胞培养室中仪器原则上只允许在细胞培养室内使用，未经实验中心负责人允许，不得将仪器带出细胞培养室，其他实验室的仪器未经允许不得私自带进细胞培养室。
8．细胞培养室冰箱，培养箱等培养室仪器发生故障以及CO2气瓶容量到达报警线以下时，应自发现起10分钟内及时通知细胞培养室负责人，以尽快维修和更换以免影响后续使用。
9．实验完毕，及时清理并保持实验室操作台、地面的干净整洁，专用工作服、拖鞋需放回原位。废液缸必须在单次实验结束后带出细胞培养室清洗干净，通过传递窗递送至细胞房外后，倒入门口专用垃圾桶并加入适量稀释的84消毒液或新洁尔灭。如发现84消毒液或新洁尔灭用完应及时配置稀释溶液。离开细胞培养室应及时关好空调、风机、日光灯与门。
10．严禁关闭细胞培养室总开关。
11．细胞培养室液氮罐只能由通过细胞培养室操作考试的人员使用，每架冻存架拿出时间不得超过3分钟,取出细胞后应及时盖上冻存罐盖子，确认无纰漏后方能离开。
二、物品管理细则
1. 带入细胞培养室内的所有物品表面需用75%酒精或紫外照射消毒。实验前，将所需物品放入台中并打开超净台紫外灯，照射时间至少30分钟。将所需试剂于37度水浴锅中复温。
2. 个人配制的试剂、消毒灭菌物品（离心管、枪头等）需标明名称、日期及个人姓名，放置于指定位置，对于标记不清或标记不规范的实验室负责人有权处理；严禁随意取用他人试剂和耗材，特殊情况需征得同意后方可取用。高压灭菌物品可存放14天，过期不能再用，需重新包装灭菌；为避免交叉污染，细胞培养室负责人有权根据标记日期处理过期物品，后果由过期物品拥有者承担。如一个月以上时间不做实验，应把细胞房内4°冰箱中的培基清理至个人冰箱。
3. 超净台中除摆放公用物品（酒精灯、移液枪、酒精棉球和封口膜等）外，其余个人物品必须在单次实验完毕后拿出超净台。公用物品用完，请向分管耗材的实验助理报告，以便及时补充。
三、安全管理细则
1.遇到超净台酒精灯起火，应沉着冷静，将挡板拉下，关闭风机，并向细胞培养室负责人报告。
2.显微镜和离心机使用完毕，需按要求切断电源。
3.严禁将与实验无关的易燃、易爆及其他有毒有害物品带入实验室；在本实验室内不得进行微生物等其它易污染物的培养。
4.二氧化碳气瓶和液氮罐由细胞培养室负责人专管，实验人员可及时汇报使用故障，不得私自更换气瓶或舀出液氮。
四、卫生管理细则
细胞房卫生实行周值与日值制度，为加强卫生管理，培训2~3名学生作为细胞房管理助理。
（1）周值:
周值负责人：在809细胞房做实验的人员，每周一人轮流做周值，具体由实验助理安排。
周值值日内容：
1、领公用日常耗材（棉球、封口膜、锡箔纸、封口袋、手套、帽子、口罩等）
2、整理冰箱及耗材存放的桌面
3、清扫实验区域地板（包括更衣间）
具体要求：细胞培养室内需每周消毒灭菌一次，用细胞培养室专用抹布沾0.1%新洁尔灭稀释液清理超净台、仪器、不锈钢桌/架、凳子等物品表面；用细胞培养室专用拖布沾0.1%新洁尔灭稀释液清理地面，后开紫外灯灭菌30分钟。
4、清洗真空泵：用0.1%新洁尔灭稀释液清洗
5、水浴锅换水，培养箱更换灭菌水
6、填写周值登记表：特殊情况及时登记，周日完成所有登记并签名
（2）日值:
日值负责人：每天最晚预约细胞房的人员
日值值日内容：
1、倒普通垃圾和实验垃圾（实验垃圾和普通垃圾分类存放，实验垃圾每天倒，普通垃圾满了再倒。实验垃圾通过传递窗递送至细胞房外后，倒入门口专用垃圾桶并加入适量84消毒液/新洁尔灭）；
2、保持实验台以及放耗材的桌面的清洁卫生；
3、如发现75%酒精和95%酒精用完，应及时配置并贴好标签；
4、关闭显微镜、真空泵、水浴锅等仪器开关，关灯关门关风机。
生物医学研究中心
2021年4月8日(试行)
