一原理

压力蒸汽灭菌器是利用高温高压的饱和蒸汽对微生物进行灭活。通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾产生蒸汽，待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌器的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度，导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。

二使用前检查事项

① 受压元件（筒体、封头）有无鼓包、变形、裂纹等；

② 检查安全附件（压力表）是否正常；

③ 检查灭菌腔内水位是否达到要求；

④ 检查排汽瓶液面是否达到要求；

⑤ 阀门、开关是否灵活，接口是否松动；

⑥ 未通蒸汽前，压力表初始位置应为零；

⑦ 门框、胶圈无损坏，下排气口不要堵塞；

⑧ 门的连锁装置要灵活可靠、开启自如；

⑨ 是否将排气管插入排气瓶水位之下。

三操作

将待灭菌物品用牛皮纸或报纸包好后，放入灭菌框中，物品之间留有空隙，以利于蒸汽与空气相互置换，灭菌效果更好，同时灭菌物品总体积不应超过灭菌腔容积的80%。

较易灭菌的小包物品放置下方，不易灭菌物品放置在上方。若布类和金属类物品同时灭菌时，应将金属类物品包放置下方，以使两者受热基本一致，并防止金属类物品灭菌中产生的冷凝水弄湿布包。

确认灭菌锅水位适宜后，将灭菌框放入灭菌锅，盖上盖子，锁定连锁装置，调好灭菌温度与时间后开始灭菌。

灭菌过程中需要操作人员时刻关注灭菌锅的运行参数，以免超温超压，同时也能确认灭菌过程不会因为意外而停止灭菌，如跳闸停电或本身灭菌锅机体故障等。

灭菌完成后，需等待灭菌锅降温降压后才能打开灭菌锅。压力降到0MPa、温度降到70℃后方可打开灭菌锅。

禁止灭菌锅还有压力时打开，同时打开时注意溢出的蒸汽，以免烫伤自己。注意操作高压蒸汽灭菌锅人员需持有特种设备上岗证，才能操作灭菌锅。

四高压蒸汽操作中常见的错误分析

（1）排气不彻底。在升压前应将锅内冷空气排净，因空气是热不良导体，若不排净，冷空气就会聚集并滞留在灭菌锅中消毒筒的中下部，围绕在待灭菌物的周围。在这种情况下，假若锅内仅排除一半空气，当压力表指针达到105Pa时，锅内实际温度仅能达到112℃，比要求的121℃低9℃之多，将导致灭菌不彻底，可能造成大面积染菌。（自动的高压灭菌锅上下排气阀都要打开然后加热排空气）

（2）排气软管没有按要求插入灭菌筒的下部，或排气软管断裂、缺失。灭菌锅内的冷空气是通过排气软管排出的，上述情况将造成灭菌筒外的蒸汽直接经排气阀排出锅外，灭菌锅内的空气排放受阻。

（3）消毒筒内物品堆积太紧、太满，阻碍蒸汽的流通和热交换，使容器内升温减慢，造成物体内部杀菌不完全。

（4）升温过快。灭菌的时间是以达到要求温度后的持续时间计算的，但温度的升降过程同样起到杀菌的作用，升降温度过快会通过影响总的积温而影响灭菌效果。另外，升温过快，特别是使用外源蒸汽的情况下，会造成被灭菌物体内部升温滞后于压力表指示温度。

（5）灭菌的物体体积（容量）过大。组织培养中或常规微生物实验中，高温蒸汽灭菌通常要在121℃（即蒸汽压力为1kg／c㎡或5磅／寸2，或0.105MPa）下保温15min。这一规定仅适用于试管、三角瓶中小于200ml容量的。若体积太大，特别是固体培养基，会造成灭菌不彻底，应适当延长灭菌时间。

（6）任意延长灭菌时间。规定的灭菌温度和时间是经过科学试验确定的，只要按照正确的灭菌程序是能达到灭菌目的的。但在实践中常有人为了“保证彻底灭菌”而任意延长灭菌时间。这样忽视了杀菌过程中温度对培养基成分的破坏作用，是得不偿失的。

（7）温度不稳定。灭菌过程中温度（压力）忽高忽低，特别是手提式电能灭菌锅，它没有控温装置，难于控温。操作者可配置调压变压器，通过调节电压控温。此外，还常遇到灭菌锅内加水太少（应加2～3L）；容器内装的溶液量过多（应少于2／3）；安全阀失灵等问题。